|
大型仪器剖析办法简介——液相色谱法液相色谱法是指活动相为液体的色谱法。尽管液相色谱法的开发现已有数十年的前史,可是,只有当活动相选用高压运送并相应地选用高效的新式固定相之后,液相色谱法的运用才得以飞速开展,人们称之为高效液相色谱(HPLC)。 近年来在环境监测等范畴的开展也很快,国内城市供水职业选用高效液相色谱剖析法测定水中多环芳烃的运用后,对多环芳烃中的一些致癌、致骤变物质,如苯并(a)芘、荼、荧蒽等,选用高效液相色谱仪装备荧光检测器,使这类物质的检测灵敏度大大提高。 (1) 高效液相色谱法基本原理。液相色谱法的别离原理和气相色谱法相同。当样品组分随活动相在柱中移动时,由于组分在两相中分配系数、吸附才能、离子交换才能的不同,或分子巨细不同引起的排阻作用的不同,经过屡次分配平衡,到达彻底别离而流出色谱柱。 依据固定相状况和别离机理的不同,液相色谱可分为4类:液-液分配色谱;液-固吸附色谱;离子交换色谱;凝胶浸透色谱。其分类和机理见表4.5.1。 依照固定相与活动相极性的相对强弱,液-液分配色谱又可分为两品种型,即正相液相色谱法和反相液相色谱法。 固定相的极性较活动相的极性强的液相色谱称为正相色谱法。由于色谱柱中固定相是极性填料,而活动相对错极性的或弱极性溶剂,因而进行正相洗脱时,试样中极性小的组分先流出色谱柱,而极性大的组分后流出色谱柱。因而,正相色谱常用于别离极性组分的样品。相反,固定相的极性较活动相的极性弱的液体色谱法称为反相色谱法。这种办法中,柱填料为非极性,活动相为极性溶剂,因而,反相洗脱时,试样中极性大的组分先流出色谱柱,极性小的组分后流出色谱柱。因而,反相色谱法常用于别离非极性的样品,由于反相色谱法操作的多变性,可别离的样品品种许多,是现在运用较多的高效液相色谱类型。 1)输液部分。输液部分主要由输液泵及活动相储存器组成。输液泵时液相色谱仪的要害部件,它起着运送液体流甚幻战动相的作用。泵应满意以下要求:流量安稳,耐高压,耐腐蚀,操作及修理便利。初牺泵的品种许多,按排液性质可分为恒压泵及恒流泵两大类。恒压泵使工作进程中体系压力坚持稳定,脚脱抖盘管泵及气动扩大泵均属此类;恒流泵使工作进程中排液量坚持稳定,螺旋打针泵和柱塞往复泵及隔阂泵均属恒流泵。现在新式液相色谱仪大都选用柱塞往复泵及隔阂泵。 液相色谱法的进样和气相色谱法的进样不同,由于高效液相色谱的输液压力可高达数十兆帕,选用隔阂打针进样只能用于较低压力,当压力达10MPa以上时不能运用。因而,也有在高压下中止输液泵,使柱进口压力变成大气压后进样,然后再开动输液泵,这种操作方法称为停流进样。 选用进样阀进样作用较好,常用的是六通阀,操作时先将六通阀手柄转至采样方位进样口,注入样品环路中,然后滚动六通阀,切换到进样方位,样品即被带入色谱柱。自动进样器是选用计算机来操控预先设定的进样程序,是较先进的进样设备。 3)别离体系。液相色谱仪的别离体系主要是色谱柱及其恒温炉箱。色谱柱在上节现已讨论过,不再赘述。柱炉采纳循环空气恒温箱,操控的精度为±0.1~0.5℃。一般恒温箱能一起操控检测器。 4)检测器。色谱柱流出组分经过检测器检出并由记载仪记载其流出曲线。液相色谱仪运用最广泛的检测器有紫外-可见吸光光度检测器(UV)、示差折光检测器(RJ)、荧光检测器(FP)。 上一篇:仪器剖析答案第三版 下一篇:水质科普|水常识小讲堂点击秒懂水质问题和处理办法!
|
|