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细胞分析(细胞活力周期增殖检测)

发布时间:2023-12-23 22:48:50 来源:lol压注软件哪个好 

  细胞活力和增殖分析大范围的应用于药物的研发,以进一步研究生长因子、细胞因子和细胞毒制剂。无论是在早期的药物发现、化合物筛选,还是随后的药物安全性和毒性研究中,高通量筛选都需要可靠、灵敏、简单和快速的细胞分析方法。细胞分析试剂盒就是一个非常好的选择,能快速实现大量的样品的分析。

  Calcein AM 细胞活力试剂盒可轻松评估样品中的细胞活力。Calcein AM 是一种膜渗透性荧光试剂,在评估不同细胞群的相对细胞活力状态方面的实用性而广受认可。

  Calcein AM 的整体疏水性使其能够以浓度梯度依赖性方式轻松穿过细胞膜的脂质双层结构。一旦进入细胞,疏水和非荧光的 Calcein AM 就会被活细胞中具有活性的细胞内酯酶快速水解。这导致两个非极性乙酰氧基甲基酯 (AM) 基团的裂解和去除。一旦 AM 基团被切割,产生的极性(亲水)和现在具有荧光能力的钙黄绿素染料分子就会有效地保留在细胞膜的范围内。由于细胞膜的疏水脂质双层组成,极性染料分子将自然地再次被动扩散回细胞外。死细胞缺乏活性酯酶,不会切割 Calcein AM。

  Biorbyt Calcein AM 细胞活力试剂盒使研究人员能够轻松同时区分单个样本中的活细胞和死细胞。使用 Calcein AM试剂盒,只需将试剂直接添加到细胞样品中、孵育和分析(无需洗涤步骤),可用流式细胞仪、荧光酶标仪或荧光显微镜分析样品。

  CellCountEZ 细胞存活检测试剂盒是一种基于组织培养基的检测的新方法,可以测量代谢活跃的活细胞并量化由辐射、化学治疗剂或毒素引起的细胞死亡。CellCountEZ 基于哺乳动物细胞通过生物还原机制快速有效地将羟乙基二硫化物 (HEDS) 转化为巯基乙醇 (ME) 的能力。HEDS 向 ME 的生物转化依赖于氧化戊糖磷酸循环 (OPPC) 的活性。

  Biorbyt CellCountEZ 细胞存活检测试剂盒无需细胞裂解和提取方法即可测量细胞外培养基中的 ME,这保留了在同一培养系统中进行其他细胞测试的能力。CellCountEZ 易于溶解,具有膜渗透性,并在转运到细胞外培养基之前在细胞内被活细胞转化。CellCountEZ 提供了许多优势,使其优于现有的量化细胞生长和存活的常用方法。

  对于正常细胞来说,DNA的含量随着细胞周期的进程而变化。Biorbyt 的细胞周期分析试剂盒可以用流式细胞仪观察染料染色的DNA,计算出G0/G1、S和G2/M的百分比,以此分析细胞周期分布和增殖活性如何。

  对于凋亡细胞,细胞内的DNAs被内源性核酸酶激活降解,并随着凋亡过程扩散出细胞。细胞周期会出现一个高度可定义的亚 G1 峰,并且很容易被染料量化。凋亡细胞中 DNA 的变化也用于分选和进一步分析凋亡细胞。RNA被RNase降解后,试剂盒中的核酸染料与细胞核中染色质组成的DNA结合,并能通过流分析结果。

  细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式来进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。可见,细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。

  常见的细胞增殖的检测的新方法最重要的包含:MTT法、WST-1法、CCK-8法和BrdU法。前三种方法主要是基于检细胞活性,从而反映出总体的增殖效果,但无法检测到单个的增殖细胞。而BrdU法是直接检测细胞中DNA的合成来进行细胞增殖检测,相对更为精确。

  MTT比色法,其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

  该方法已大范围的使用在一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度较高、经济。

  但是由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水,需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加,也会对实验结果的准确性产生一定的影响,而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害。

  WST-1 是大范围的应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高度灵敏检测试剂,WST-1是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜(formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。

  WST-1是MTT的一种升级替代产品,相比MTT有更明显的优点。WST-1检测中产生的甲臜是水溶性的,可以省去后续溶解步骤,减少误差,所以比MTT法更方便灵敏。

  Biorbyt CCK-8 试剂盒全称为Cell Counting Kit-8, 是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒,利用高度水溶性的四唑盐可以十分便捷地进行检测。

  WST-8的原理与WST-1基本一致,也是在电子耦合试剂存在的情况下,可被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜(formazan),细胞中脱氢酶活性所产生的甲臜染料的量与活细胞的数量成正比。CCK-8法生成的甲臜是高度水溶性的,CCK-8的检测灵敏度高于MTT、XTT、MTS或WST-1等其他四唑盐,对细胞毒性小,为1瓶溶液,不需预制,即开即用。

  Biorbyt BrdU 细胞增殖检测试剂盒是一种非同位素酶免疫检测试剂盒,可用于定量 DNA 合成和细胞增殖。

  Brdu,即5-Bromo-2-Deoxyuridine,中文全名5-溴脱氧尿嘧啶核苷,为胸腺嘧啶的衍生物,可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期),活体注射或细胞培养加入,而后利用抗Brdu单克隆抗体,过免疫化学方法检验测试,从而能够评估正在积极合成 DNA 的细胞群。测定快速、易于执行并且适用于高样品通量。除了评估细胞增殖外,还可以从单一培养物中获得细胞数量、形态和细胞抗原分析等信息。同时结合其它细胞标记物,双重染色,可判断增殖细胞的种类,增殖速度,对研究细胞动力学有重要意义。

  Biorbyt 能够给大家提供以上所有类型的细胞分析试剂盒,包括Calcein AM 细胞活力检测试剂盒,CellCountEZ 细胞存活检测试剂盒,细胞周期分析试剂盒,MTT 细胞增殖检测试剂盒, WST-1细胞检测试剂盒,CCK-8 细胞检测试剂盒和BrdU 细胞检测试剂盒,欢迎咨询采购!

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